南京市第二十七高级中学简称“南京二十七中”,是一所经南京市人民政府批准由原南京市第二十七中学和原南京市第四十二中学合并组建的一所独立设置的高级中学,是南京市重点中学。学校前身为1943年成立的南京市第二十七中学以及1956年成立的南京市第四十二中学,2005年5月,两校合并组建为南京市第二十七高级中学。
学校有多媒体教室41个;理、化、生实验室10个;计算机、音乐、美术、史地、通用技术等专用教室14个;有2个室内运动场馆和2个塑胶田径运动场;拥有1000兆校园网络系统;学校图书馆藏书53980册,生均图书达到46.4册以上;各类光盘、电子读物、音像资料计2万余件,报刊250种。
截止2016年,学校有高中专任教师153人,其中已有28人获硕士学位;中学高级教师72人,一级教师73人,中、高级技术职称教师占专任教师的94.7%。学校有特级教师3人,市名教师1人,江苏省第四期“333高层次人才培养工程”第三层次培养对象2人,市学科带头人7人,市优秀青年教师10人,区学科带头人34人、区优秀青年教师48人。
1943年春,叶祥发出资筹办私立昌明中学。
1951年初,中华门的生源中学和莲子营的伯纯中学并入昌明中学。
1951年8月,南京市教育局指令昌明中学和励群中学合并,定名为私立城南中学。
1956年6月,城南中学奉命改为南京市第二十七中学。
1956年,晨光集团转制创办南京市第四十二中学的完全中学。
1998年,学校被评为南京市重点中学。
2000年,学校被评为江苏省重点中学。
2005年5月,经南京市人民政府批准由原南京市第二十七中学和原南京市第四十二中学合并组建为南京市第二十七高级中学。